乳铁蛋白又称乳转铁蛋白、红蛋白,是80 kDa的铁结合糖蛋白,存在于哺乳动物的乳汁中,含量与动物种属相关,以人乳、牛乳为典型代表。人初乳中乳铁蛋白含量高达6.0 mg/L~8.0 mg/mL。人常乳中含量为2.0 mg/L~4.0 mg/mL,约占普通母乳总蛋白的20%,是牛乳中含量的10倍以上。
乳铁蛋白具有多种生物学活性,具有参与铁代谢、抗肿瘤、抗氧化、抗菌、阻断氧自由基、调节免疫和抗炎症、促进细胞增长、减少内脏脂肪等多种功能,是一种极具广阔市场前景的功能性蛋白。《GB 14880-2012 食品营养强化剂使用标准》规定,乳铁蛋白作为食品营养强化剂,允许使用的食品类别包括调制乳(≤1.0 g/kg)、风味发酵乳(≤1.0 g/kg)、含乳饮料(≤1.0 g/kg)、调制乳粉(≤1.0 g/kg)和婴幼儿配方食品(以即食状态计≤1.0 g/L)。近年来,在各种乳制品中添加乳铁蛋白,从而提高产品的营养价值,成为乳制品行业的新热点。添加了乳铁蛋白的乳制品,得到市场的追捧,为广大消费者所青睐。
《GB1903.17—2016 食品营养强化剂 乳铁蛋白》规定了作为食品营养强化剂的乳铁蛋白的各项技术要求,在附录A中规定了乳铁蛋白占总蛋白质量百分比的高效液相色谱法。除此以外,至今我国没有其他有关乳铁蛋白的国家标准检测方法。食品生产企业使用乳铁蛋白作为营养强化剂生产食品,生产过程中没有合适的检测方法对产品进行品质安全控制。产品进入市场后,食品安全监管机构也没有合适的检测方法对市售商品进行标签符合性检验监管。2019年,团体标准T/TDSTIA 006—2019《奶及奶制品中乳铁蛋白的测定 液相色谱法》发布实施,规定了生乳、液态奶和乳粉中乳铁蛋白的液相色谱测定方法。液相色谱法需要昂贵的检测仪器设备和耗材,对实验室硬件条件和检测人员的技能要求较高,检测结果容易受到成分复杂的样品中基质背景干扰的影响,难以满足食品行业日常生产质控和食品安全检验监管机构批量快速筛查的需要。2021年中国食品科学技术学会发布实施T/CIFST 006-2021《食品中乳铁蛋白的测定 酶联免疫吸附法》,为行业提供了更为可靠的团体标准。但为进一步满足食品行业对食品中乳铁蛋白含量检测的实际需要,应当尽快建立定量准确、操作简便、人力和经济成本合理、适合基层实验室广泛应用的标准检测方法。
本标准采用ELISA法,利用抗原-抗体特异性结合反应,对多种乳制品和婴幼儿配方食品中乳铁蛋白含量进行竞争性酶联免疫吸附测定,具有特异性高、敏感性强、快速方便、不需要昂贵仪器设备等优点,可以大大节省检测时间和检测成本。本标准与团体标准《T/TDSTIA 006—2019奶及奶制品中乳铁蛋白的测定 液相色谱法》相比,共同点是均利用抗原—抗体特异性结合反应捕捉样品中的乳铁蛋白,不同之处主要包括:不需要重复利用耗材,因此无需考虑耗材疲劳影响检测性能下降;检测试剂耗材成本低廉;通量高,可以同时进行多个样品的检测;无需昂贵的仪器设备。因此,本标准可以填补目前国内缺乏适用的食品中乳铁蛋白含量检测方法标准的窘况,为企业生产质控和监管机构标签符合性检验提供重要的技术支撑。